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A automação em hematologia revolucionou os processos laboratoriais, permitindo o processamento rápido e preciso de amostras sanguíneas. Um dos métodos amplamente utilizados na automação em hematologia é a citometria de fluxo. Diante disso, assinale a afirmativa correta sobre o método de citometria de fluxo empregado na automação em hematologia.

A Baseia-se na dispersão de luz e não utiliza anticorpos marcados com fluorocromos para a análise das células sanguíneas.
B Utiliza corantes convencionais para diferenciar os tipos de células sanguíneas, o que limita sua aplicação em análises mais complexas.
C Refere-se a uma técnica de análise exclusiva para células sanguíneas maduras, não sendo aplicável na detecção de células imaturas ou progenitoras.
D Analisa apenas a morfologia das células sanguíneas, não permitindo a identificação de marcadores de superfície ou a avaliação de parâmetros funcionais.
E Permite a análise simultânea de múltiplos parâmetros em cada célula, incluindo a identificação de marcadores de superfície, a morfologia celular e a análise funcional.

Sobre os corantes empregados na hematologia, marque V para as afirmativas verdadeiras e F para as falsas.

( ) Azul de cresil brilhante é o corante que possui baixa afinidade pelo RNA; é utilizado na coloração de reticulócitos.

( ) O azul de metileno é um corante ácido que reage com componentes básicos das células e tecidos, os quais incluem grupos fosfatos; ácidos nucleicos; grupos sulfatos de glicosaminoglicanas; e, grupos carboxila das proteínas.

( ) A eosina é um corante básico que reage com componentes ácidos das células e tecidos. A eosina geralmente cora as estruturas em vermelho ou rosa. A sequência está correta em

A V, V, V.
B F, F, V.
C F, V, F.
D V, F, F.
E F, F, F.

Os métodos moleculares para o diagnóstico de doenças infecciosas trouxeram grandes avanços às análises laboratoriais. Dentre as várias técnicas descritas na literatura, destaca-se a reação em cadeia da polimerase (PCR) como uma das mais proeminentes. Considerando os princípios e etapas da PCR, analise as afirmativas a seguir.

I. Dois iniciadores oligonucleotídeos que flanqueiam o DNA-alvo são adicionados em excesso ao DNA-molde que é desnaturado termicamente.

II. O íon magnésio é essencial, pois atua como cofator para a ação da enzima DNA-polimerase.

III. A etapa de desnaturação do DNA ocorre em temperaturas inferiores às da etapa de anelamento dos iniciadores oligonucleotídeos. A sequência está correta em

A I, II e III.
B I, apenas.
C I e II, apenas.
D I e III, apenas.
E II e III, apenas.

A espectrometria de absorção tem sido o principal meio de mensuração em analisadores automatizados para medir uma ampla variedade de compostos. O equipamento se baseia no princípio da quantidade de luz absorvida ou refletida, de acordo com as leis de Lambert-Beer . Considerando o exposto, assinale a afirmativa INCORRETA.

A A transmissão luminosa aumenta na medida em que se intensifica a concentração da solução em análise.
B A hemólise libera a hemoglobina das hemácias e a hemoglobina livre interfere em uma faixa de comprimento de onda (desde 415 até 570 nm), que pode afetar a leitura das concentrações dos analitos, cujos ensaios utilizam os mesmos comprimentos de onda.
C A base da espectrofotometria consiste em passar um feixe de luz através da amostra e fazer a medição da intensidade da luz que atinge o detector.
D A determinação da concentração do analito é feita a partir da comparação de uma solução-padrão de concentração conhecida da mesma substância.
E Devido à alta sensibilidade, é essencial que seja submetido a uma limpeza regular e empregado corretamente para garantir resultados confiáveis e exatos.

Sobre as hemofilias, deficiências congênitas dos fatores hemostáticos de caráter genético e hereditário, assinale a afirmativa INCORRETA.

A O fator de coagulação específico diagnosticado laboratorialmente na hemofilia B é IX.
B As hemofilias A e B são doenças hemorrágicas hereditárias ligadas ao cromossomo Y, que afetam primariamente indivíduos do sexo masculino.
C A classificação da hemofilia A varia conforme os níveis de atividade coagulante do fator VIII, sendo especificados como graves; moderados; e, leve.
D Como os níveis do fator VIII podem também estar reduzidos na Doença de Von Willebrand (DVW), a atividade do Fator de Von Willebrand (FVW), o antígeno e a composição multimérica são dosados em pacientes com hemofilia A recém-diagnosticada.
E O coagulograma com alargamento do Tempo de Tromboplastina Parcialmente Ativada (TTPa) e o tempo de protrombina (TP) normal são observados na maioria das vezes, com exceção de alguns casos de hemofilia leve, cujo TTPa permanece normal.

Os anticorpos são compostos por uma cadeia pesada (cadeia H) e uma cadeia leve (cadeia L); as Lambda e Kappa do tipo leve são encontradas nos anticorpos. Diante do exposto, assinale a afirmativa correta.

A Uma imunoglobulina pode possuir cadeia Kappa e cadeia Lambda .
B A relação entre os dois tipos de cadeias leves não varia de espécie para espécie.
C Qualquer um dos tipos de cadeia leve poderá ser encontrado somente em IGG.
D Diferenças funcionais são encontradas entres anticorpos com cadeias leves Lambda ou Kappa .
E Distorções encontradas na relação entre as cadeias leves Kappa e Lambda podem ser usadas para detectar a proliferação anormal de um clone de células B.

Considerando que na interação da molécula do anticorpo com o antígeno específico observa-se que regiões localizadas de sequência hipervariável formam o sítio de ligação com o antígeno, assinale a afirmativa INCORRETA.

A As regiões situadas entre as sequências hipervariáveis, que fazem parte do domínio V, exigem menos variabilidade e são conhecidas como regiões estruturais.
B As três alças hipervariáveis determinam a especificidade ao antígeno pela formação de uma superfície complementar designada de regiões determinantes de complementaridade.
C Três regiões de especial variabilidade podem ser identificadas nos domínios V das cadeias pesadas (V H ) e leves (V L ), conhecidas como regiões de hipervariabilidade; são chamadas: HV1, HV2 e HV3.
D As regiões variáveis de um anticorpo são diferentes para cada molécula de anticorpo. A variabilidade da sequência é uniformemente distribuída nas regiões variáveis e concentrada em alguns locais da região variável.
E Uma consequência da contribuição das regiões determinantes de complementaridade dos domínios V H e V L para o sítio de ligação ao antígeno é o fato da combinação das cadeias pesada e leve determinar a especificidade antigênica final.

A reação de precipitação proporciona um ensaio quantitativo para os anticorpos. Considerando que é importante entender esta interação do antígeno com o anticorpo, que leva à formação dos complexos imunes antígeno-anticorpo, assinale a afirmativa INCORRETA.

A Na zona de equivalência, grandes mosaicos de antígeno e anticorpos são formados por ligações cruzadas.
B Quando grandes quantidades de antígenos são adicionadas, são formados somente pequenos complexos antígeno-anticorpo; e, muitas vezes, são insolúveis nessa zona de excesso de antígeno.
C Quando quantidades suficientes de anticorpos são misturadas com os antígenos macromoleculares, é possível a formação de um precipitado visível, constituído de grandes agregados antígeno-anticorpo.
D A reação de precipitação pode ser afetada pelo número de sítios de ligação que cada anticorpo possui para o seu antígeno e pelo número máximo de anticorpos que podem ser ligados por uma molécula de antígeno.
E Quando pequenas quantidades do antígeno são adicionadas aos complexos antígeno-anticorpo, cada molécula de antígeno está amplamente ligada por anticorpos e com ligação cruzada com outras moléculas de antígenos.

Considerando que as enzimas proteolíticas que clivam sequências polipeptídicas têm sido empregadas para analisar a estrutura das moléculas de anticorpos e determinar que partes da molécula são responsáveis por suas várias funções, assinale a afirmativa INCORRETA.

A A pepsina cliva na mesma região da molécula de anticorpo que a papaína; porém, no lado carboxiterminal das ligações dissulfídicas.
B O padrão exato dos fragmentos obtidos após a proteólise depende de onde a protease cliva a molécula do anticorpo em relação às pontes dissulfídicas que unem as duas cadeias leves.
C A digestão limitada da papaína cliva as moléculas de anticorpos em dois fragmentos idênticos: Fab ( Fragment Antigen-Binding ) e outro que se cristaliza facilmente FC ( Fragment Crystallizable ).
D A papaína cliva a molécula do anticorpo no lado amino-terminal das ligações dissulfídicas, desprendendo os dois braços do anticorpo como fragmento Fab separados; no fragmento FC, as metades carboxiterminais permanecem unidas.
E O fragmento F(ab’) 2 tem exatamente a mesma característica de ligação ao antígeno que o anticorpo original, mas não interage com nenhuma molécula efetora e, consequentemente, tem um grande potencial em aplicações terapêuticas de anticorpos.

Os seguimentos gênicos das imunoglobulinas estão organizados em três grupos ou loci genéticos – genes de cadeias leves ( K e λ ) e de cadeias pesadas. Considerando que tais grupos estão localizados em diferentes cromossomos e cada um é organizado de maneira levemente desigual, assinale a afirmativa INCORRETA.

A Geralmente, uma célula expressa somente um tipo de imunoglobulina por vez.
B O grupo de genes da cadeia pesada contém uma única região C que corresponde a um único isotipo.
C Nos genes de cadeias leves K , no cromossomo 2, o grupo segmentado V K é seguido por um grupo de segmentos J K e por um único gene C K .
D A organização dos genes de cadeia pesada no cromossomo 14 assemelha-se à dos genes K , com grupos separados de segmento V H , D H e J H e de C H .
E Para os genes de cadeia leve ? no cromossomo 22, há um grupo de segmentos V ? , seguidos por quatro grupos de segmentos J ? , cada um ligado a um único segmento C ? .